引物设计 测序 PCR 探针

PCR扩增引物要在目的片段两测150bp位置为宜，这样设计的原因是既可以有效控制扩增产物的大小，因为太长的片读一个测序反应无法得到全场序列，又可以给测序设计内引物留出足够的空间。由PCR特性决定的，不是所有的PCR扩增引物都可以作为测序引物使用，因此在设计扩增引物的时候就要将测序内引物的位置留出来，以防扩增引物测序失败的时候，由于无法设计内引物还需要重新进行扩增的麻烦。
引物设计可使用一下网址：http://frodo.wi.mit.edu/primer3/
祝好运~

design of primer for automatic sequencing:

http://seqcore.brcf.med.umich.edu/doc/dnaseq/primers.html

PCR primer design:
http://www.premierbiosoft.com/tech_notes/PCR_Primer_Design.html

Good luck.