如何分离分子量相同的单链DNA和单链RNA

来源:百度知道 编辑:UC知道 时间:2024/05/25 15:22:17
如何分离 分子量相同的 单链DNA和单链RNA

需要详细的说明哦 什么试剂 如何操作

老师们 学长们 帮帮忙 谢啦

甲醛变性凝胶电泳并不能区分相相同大小的ssDNA和ssRNA.因为二者长度一致,在凝胶中泳动速率也一致。

目前有可分离ssRNA和ssDNA的技术,我只是看过一个设想,但没有后续的实验报道。即使用纯化的SSB蛋白(就是单链DNA结合蛋白,其体内功能是DNA复制时结合解旋酶解开而成的单链DNA,防止复性)作为亲和柱固相,亲和层析DNA/RNA溶液,由于SSB能够特异性的结合ssDNA,因此能够分离ssDNA和ssRNA。

此外,如果不要求得率的话,直接用RNaseI处理即可获得ssDNA。

很简单的,不要把问题复杂化
如果单链的DNA与RNA分子量相同,那么他们的链长肯定不同,所带电荷也不同。这样,琼脂糖凝胶电泳就能将其分离。然后提取出来就行了
方法2
将其分为两份,一份用DNA酶充分消化,一份用RMA酶充分消化,得到的不就是一份RNA,一份DNA吗?
希望我的回答对您有帮助

方法1:DNA溶于苯酚,RNA不溶,故可用苯酚来沉淀,这是最简单的方法。
方法2.:利用吖啶橙的变色特性可鉴别DNA和RNA。吖啶橙作为一种荧光染料已被用于染色固定,非固定细胞核酸,或作溶酶体的一种标记。观察死亡细胞荧光变色性变化以及区别分裂细胞和静止细胞群体。虽然测定DNA和RNA含量时较难获得好的重复性结果,但该方法已被许多实验室广泛采用。

(RNA)甲醛变性凝胶电泳。

参见 http://virology.blog.sohu.com/41678197.html

所谓“单链构象多态性分析-sscp”。

最简单的,分成两份,一份加DNase I,
一份加RNAase A,还有要看这些DNA和RNA能不能配对,
如果能配对加后一分要加RNase H,而不是RNase A了高级一点的,HPLC,高效液相色谱。