巢式PCR是什么意思?

来源:百度知道 编辑:UC知道 时间:2024/05/30 12:37:35
不知道是干什么用的

巢式PCR(nested PCR),是指利用两套PCR引物(巢式引物)对进行两轮PCR扩增反应。
在第一轮扩增中,外引物用以产生扩增产物,此产物在在内引物的存在下进行第二轮扩增。
由于巢式PCR反应有两次PCR扩增,从而降低了扩增多个靶位点的可能性(因为与两套引物都互补的引物很少)增加了检测的敏感性;又有两对PCR引物与检测模板的配对,增加了检测的可靠性。
一般应用于动物方面。如:病毒,梅毒螺旋体,HIV,肿瘤基因等

标准Protocol在此:http://www.zoology.ubc.ca/~alorch/konested.htm
此外,还引生出半巢式PCR,多重巢式PCR等等

巢式聚合酶链反应(nested polymearse chain reaction, nPCR)也称套式PCR。在这种技术中,首先用一对外引物进行第1轮PCR,然后再使用第1对引物扩增的DNA序列内部的一对引物再次扩增,所以称为巢式PCR。由于使用了两对引物并且进行了两轮扩增反应,因此试验的敏感性和特异性均增强。在一定情况下,这种方法对减少PCR后扩增产物的污染问题极为有用,但它增加了每次试验的复杂性。为了经济节约,可在第2轮扩增时采用半巢式,设计单条引物,另一条引物与第1轮扩增共用,效果也优于单次扩增。