正常人血浆中肝素的浓度是多少

来源:百度知道 编辑:UC知道 时间:2024/05/22 06:18:12

血浆肝素水平的监测,现以凝固试验应用较多,如凝血酶时间、部分凝血活酶时间等〔1~3〕,这些方法均是以一段时间范围衡量肝素的抗凝活性,无法精确定量测定。最近有高效液相色谱法分离测定血中游离肝素含量的报道〔4〕。本文介绍用高效毛细管电泳法(HPCE)测定血浆中肝素含量,能直接定量测定,且与凝血酶法〔3〕测定结果进行对照,含量抗凝效果一致。本文
  方法快速、方便、灵敏度高,能直接进行大剂量检测,且不受纤维蛋白降解产物(FDP)等其它因素的影响。与高效液相色谱法相比具有操作简便、自动进样等优点。

  1 研究对象

  正常人5名,体外循环10例(肝素钠,按360~500U/kg给药),血液透析23
  例(10例肝素钠、5例小剂量肝素钠、3例大剂量肝素钠分别按65、10.5、120U/kg
  给药;5例肝素钙按50U/kg给药)以上均为一次性给药,给药后30min采血。

  2 仪器与试剂

  Bio-Focus 3000 Capillary Electrophoresis System(美国Bio—RAD公司);未涂渍
  毛细管(30cm×50μm,河北永年光导纤维厂);肝素钠水溶液(250000U/L,上海
  生物制药厂产品),肝素钙水溶液(500000U/L,云南生化制药有限公司产品)。
  以上2种肝素抗凝活性用美国药典(USP)的标准肝素钠(350000U/L)校正。与厂家
  标示量相符。SDS(Bio—RAD,USA)电泳纯级,乙腈为色谱纯级,硼砂、氢氧化
  钠均为国产分析纯级。

  3 实验方法

  3.1 血样处理 研究对象静脉采血2mL(109m mol/L的枸橼酸钠1∶9抗凝),离心,
  分离出血浆约1.0mL(3000g×15min),加入乙腈(血浆与乙腈比例为2∶3)混匀,
  充分混合后放置1min,待蛋白沉淀后再次离心(3000g×15min),取上清液,仪器
  自动进样。未经乙腈处理的血浆可保存,但不超过一周,不允许反复冻融。

  3.2 对照品溶液的配