怎样利用基因工程制药？

基因工程技术可生产的药物和制剂包括:
(1)免疫性蛋白,如各种抗原和单克隆抗体;
(2)细胞因子,如各种干扰素,白细胞介素,集落刺激生长因子,表皮生长因子,凝血因子;
(3)激素,如胰岛素,生长激素,心素纳;
(4)酶类,如尿激酶,链激酶,葡激酶,组织型纤维蛋白溶酶原激活剂,超氧化物歧化酶.

基因工程药物生产的基本过程
定义:基因工程技术是指将重组对象的目的基因插入载体,拼接后转入新的宿主细胞,构建成工程菌(或细胞),实现遗传物质的重新组合,并使目的基因再工程菌内进行复制和表达.
基因工程药物制造的一般流程:
(1)获得目的基因;(2) 组建重组质粒;(3)构建基因工程菌;(4)培养工程菌;(5)产物分离纯化;(6)除菌过滤;(7)半成品检定;(8)包装
1,上游阶段:首先获得目的基因,然后用限制性内切酶和连接酶将其插入适当的载体质粒或噬菌体中并转大肠杆菌或其它宿主菌(细胞),以便大量复制目的基因.选择基因表达系统主要考虑的是保证表达功能,其次要考虑的是表达量的多少和分离纯化的难易.其中的(1),(2),(3)步骤属于上游阶段,在实验室完成.
2,下游阶段:将实验室成果产业化,商品化,它主要包括工程菌大规模发酵最佳参数大的确立,新型生物反应器的研制,高效分离介质及装置的开发,分离纯化的优化控制,高纯度纯品的制备技术,生物传感器等一系列仪器仪表的设计和制造,电子计算机的优化控制等.上述(4),(5),(6),(7),(8)等属于下游阶段.

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目的基因的获得
一,逆转录法
逆转录法是先分离纯化目的基因的mRNA,再反转录成cDNA,然后进行cDNA的克隆表达.
1,mRNA的纯化
mRNA的特点:3'末端含有一多聚腺苷酸组成的末端.
方法:亲和层析法
2,cDNA第一链的合成
一般 mRNA都带有3'-polyA,所以可以用寡聚dT作为引物,在逆转录酶的催化下,开始cDNA链的合成.
用放射性探针法检测.
3,cDN