香樟叶片DNA提取方案?

来源:百度知道 编辑:UC知道 时间:2024/05/24 20:05:19
香樟叶片DNA提取方案?

CTAB

要详细的,如果满意的话可以补加分。谢谢

1. 将植物组织洗净,用75%的酒精表面消毒4-5min,用去离子水冲洗3次;
2. 将样品放在灭过菌的研钵中,加入液氮捣碎,迅速转入1.5ml离心管中,加入600mlCTAB(或同时加入石英砂和CTAB研磨,然 后转入1.5ml离心管中);
3. 65℃水浴1h(每20min反转摇匀一次);
4. 加等体积的氯仿-异戊醇(体积比24:1),颠倒混匀;
5. 6500rpm离心30min,取上清于新管中;
6. 重复4,5步骤;
7. 向上清中加入2倍体积的无水乙醇沉淀DNA,-20℃放置20min或更长时间,或过夜;
8. 12000rpm离心5min,去上清;
9. 加75%的乙醇清洗DNA,每次12000rpm 2min,去上清;
10. 风干后加入40ul的TE缓冲液溶解DNA;
11. 取2ul溶液电泳检测。