UC知道关于SDS-PAGE电泳
来源：百度知道 编辑：UC知道 时间：2024/05/22 06:59:42
小弟最近在做SDS-PAGE，发现了一些问题
1.胶凝固后会缩一点点，导致加样孔变浅
2.两边的两个孔加样后跑出来的条带不直
不知是否正常，如果不正常问题可能是什么原因造成的
不要复制长编大论，电泳的书我有
因为我做的是不连续电泳，而且是薄胶，最后加胶都是满出来的，没加封胶面的液体，所以一缩水加样孔就很小了。在做厚胶时影响不是很大。样品少时两边的孔我都不加的，但样品多时就没办法了。电泳时槽底部肯定会产生一些小气泡的，我不可能总是在那儿赶气泡吧。我想会不会是胶在凝聚过程中两边由于的范德华力作用而密度不均匀造成的？我有看过两边的孔也跑得很直的胶，不知是怎么做的？
1.胶凝固后会缩一点点，导致加样孔变浅
2.两边的两个孔加样后跑出来的条带不直
不知是否正常，如果不正常问题可能是什么原因造成的
不要复制长编大论，电泳的书我有
因为我做的是不连续电泳，而且是薄胶，最后加胶都是满出来的，没加封胶面的液体，所以一缩水加样孔就很小了。在做厚胶时影响不是很大。样品少时两边的孔我都不加的，但样品多时就没办法了。电泳时槽底部肯定会产生一些小气泡的，我不可能总是在那儿赶气泡吧。我想会不会是胶在凝聚过程中两边由于的范德华力作用而密度不均匀造成的？我有看过两边的孔也跑得很直的胶，不知是怎么做的？
1.一般来说，加样孔还是足够深的应该有（1cm），如果觉得比较浅可以多加一点浓缩胶，用来压制胶水平的水或乙醇一点点就可以了。
2.如果只是两边的孔走样，中间的没问题的话，两边的孔加样后条带不直，很可能是电泳槽下面的气泡没有排尽，或者根本就没有注意下面有气泡，另外在电泳过程中因为会产生热，也会产生气泡，如果有可以用滴管吹打排出。气泡不导电，当然会破坏均匀的直流电场，条带就不直了。
另外，为了防止产热，可以将电泳槽放在冰水中散热。电泳过程影响因素较多，为了安全起见，尽量不要用两边的孔。
自来水成分太复杂,里面有漂白粉的话是不是还会影响缓冲液??
具体去丁香园医学论坛问问吧
缩水是正常的,看你的说法应该是用垂直平板的电泳槽,那么梳子应该很大的,所以胶孔应该够用的,两面的胶孔就放弃吧!!!因为两边的胶孔受影响比较大,比如封闭玻璃板的凡士林等都会使胶面不均一的,另外就是气泡,但是我估计你应该知道排除气泡的