关于物质分离方面的问题

来源:百度知道 编辑:UC知道 时间:2024/06/15 07:16:22
小弟现在做一种菌液中D-葡萄糖二酸-1,4内酯的测定,不知道应该用哪种分离仪器比较好?气相?液相OR毛细管电泳?真是郁闷啊!恳请这方面的专家给小弟解答一下,不胜感激!

我建议是气相方法,因为此法简便经济,精度很高,而且次方面已有过相关研究并取得成功,不妨一试。液相方法如果是菌液,需要先提纯,因为液相色谱柱不能污染太贵了,电泳的分子必须是带电的,显然不太合适,
下面是一种比较好的分析方法,不妨参考以下。
红茶菌中D- 葡萄糖二酸1,4 内酯的气相色谱检测法

由于文献介绍的测定D- 葡萄糖二酸1,4内酯的气相色谱方法[3],其前处理过程非常复杂,首先要将内酯甲酯化然后硅烷化降低物质极性后,用非极性柱测定,该方法由于要经过复杂的化学反应过程,有多种物质参与其中,反应物、生成物、中间产物种类繁多,本文作者即便是使用标样经过上述处理过程后检测出的色谱峰图也很复杂,难以辨认目的峰。本文介绍的检测方法采用中极性柱,标样溶于溶剂后直接进样检测,色谱图清晰明了,样品的前处理方法也被大大简化了。该方法具有灵敏度高、前处理简便、测定速度快、成本低等优点。

1 材料与方法

1.1 仪器与试剂

1.1.1 仪器

Shimadzu GC — 14C 气相色谱仪;氢火焰离子检测器(FID) ; 色谱柱 DM-1701 30m×0.25mm×0.25μm 中极性柱;微量进样器 5μl 澳大利亚;TDL-5-A 型台式离心机 上海安亭科学仪器厂。

1.1.2 试剂

D- 葡萄糖二酸1,4 内酯 C6H8O7·H2O,分析纯,美国Sigma 公司;甲醇 优级纯。

1.1.3 标样的配制

准确称取D- 葡萄糖二酸1,4 内酯100.0000mg,用甲醇定容至10ml 的容量瓶中,浓度为10000 × 10-6,分别从中吸取5、2、0.1、0.5ml,各自定容至10ml 的容量瓶中,浓度分别为5000 × 10-6、2000 × 10-6、100 × 10-6 和500 × 10-6。

1.2 色谱条件

温度 进样口:250℃;检测器:250℃;柱温:初始50℃,每分钟升12℃到220℃保持8min。流速 载气(N2 ) :1.56ml/min;燃气(H2) :45ml/min;助燃气(空气):450ml/