蛋白定量检测方法--双缩脲法,即Biuret法,在什么时候,由谁提出的?

来源:百度知道 编辑:UC知道 时间:2024/06/02 02:15:41

金标法C-反应蛋白全血定量检测方法

发布时间:02年[$mon
原理:ycoCard CRP是一种固相的夹心法免疫试验。稀释后的样品加于卡片上6个试验孔中的1孔,标本流过反应膜,CRP分子即被固定于膜上的CRP特异性单克隆抗体所捕获,CRP将和随后加入的胶体金抗体结合物相结合,发生双抗体夹心法的反应。未结合的金标抗体,用一滴洗涤液将其从膜上清除,滤纸层将吸收过剩的液体。在标本中CRP达到病理的水平,膜上出现紫红色,颜色的强度和CRP浓度比例有关。颜色的强度可以用肉眼观察和参考比色卡相比较作出半定量的估计,或者用NycoCard READER金标定量仪作定量测定。

特异性:
----在试验中应用了抗人CRP的特异的单克隆抗体。没有发现其他的血液成份在这个NycoCard CRP试验系统中有交叉反应。

标准化:
NycoCard CRP全血法是以CRM470(IFCC/BCR/CAP参考品)所校准的。

测定范围:
CRP 10-200mg/L

精确度:
在质控实验室的试验,通常可得到的精确度是变异系数(CV)5-8%。这和整个测定的范围,也和仪器读结果有关。

干扰因素:
用肝素、枸橼酸钠或EDTA不影响试验。增高的胆红素水平、脂类或类风湿因子(RF)不影响试验的结果。当血球比积大于50%,应该加以校正。

试验盒组成,(48人份)
试验卡片:4×2PCS
每个试验卡片有6个试验孔,这些孔下方垫有渗水的包被抗CRP单克隆抗体的膜。
R1 稀释液:2×26×1.0ml
硼酸盐缓冲液(PH9.0)及洗涤剂。
R2结合物:1×3.0ml
含有用胶体金标记的抗CRP单克隆抗体的磷酸盐缓冲液。
R3洗涤剂:1×4.5ml
磷酸盐含钠缓冲液(PH7.4)及洗涤剂。
阳性质控品:1×0.5ml
加入纯化的CRP的人血清。CRP浓度在标签上。
毛细吸管:50支
25ul含有肝素钠的玻璃毛细管。
滴吸管:2支
分别用于R2结合物(黑帽)和