酶联免疫吸附测定中,为什么要用到第二抗体?酶为什么不能直接和第一抗体连接?

来源:百度知道 编辑:UC知道 时间:2024/06/05 06:22:02

一抗是特异性抗体,一般生产厂家是不会标记一抗的,因为产量和销量都很少,回收效率低,二抗不值钱,比较划算,而且我们大部分是拿ELISA测自己做的一抗的效率,标记回收以后效价会大大减少,就不能用了。
实验室自己做一个抗体,得到几十毫升的抗血清,加上纯化大概要一万多块,标记完不能用了岂不是哭死。而且标记以后会对抗体性质产生影响,效价不稳定。一抗本来就是多抗,很难纯化,折腾得次数越多活性越低,没人敢冒这个险。公司一般只生产常用一抗和二抗,二抗都是羊抗和马抗,一次可以得到几升的血清,相对而言,来源广,便宜,便于商业操作。而且一次获得大量品质均一的产品,保证试验的稳定性

一抗与目的蛋白特异结合,而二抗是与一抗特异结合的