什么是rep-PCR

来源:百度知道 编辑:UC知道 时间:2024/06/03 21:21:05

Rep-PCR:Versalovic于1996年描述的一种细菌基因组指纹分析方法,即细菌基因组重复序列PCR技术(rep-PCR)是扩增细菌基因组中广泛分布的短重复序列,通过电泳条带比较分析,揭示基因组间的差异。细菌基因组中广泛分布的短重复序列(repetitive sequence),包括常用的REP(repetitive Extragenic Palindromic,基因外重复回文系列)、ERIC(肠杆菌基因间重复一致序列)和BOX,它们在菌株、种、属水平上分布有差异及进化过程有相对保守性。Rep-PCR目前发展迅速并被广泛应用于多种细菌基因分类,此方法操作方便,可以大样本进行。REP-PCR分辨效果好,可重复性强,比 RFLP、生化分型,核糖体分型要好。REP-PCR目前可自动化分型,并可建立各种细菌REP、ERIC-PCR分型标准数据库。

PCR是DNA的体外扩增技术.

PCR(聚合酶链式反应)原理
PCR是体外酶促合成特异DNA片段的方法,主要由高温变性、低温退火和适温延伸三个步骤反复的热循环构成: 即在高温(95℃)下,待扩增的靶DNA双链受热变性成为两条单链DNA模板;而后在低温(37~55℃)情况下,两条人工合成的寡核苷酸引物与互补的单链DNA模板结合,形成部分双链;在Taq酶的最适温度(72℃)下,以引物3’端为合成的起点,以单核苷酸为原料,沿模板以5’→3’方向延伸,合成DNA新链。这样,每一双链的DNA模板,经过一次解链、退火、延伸三个步骤的热循环后就成了两条双链DNA分子。如此反复进行,每一次循环所产生的DNA均能成为下一次循环的模板,每一次循环都使两条人工合成的引物间的DNA特异区拷贝数扩增一倍,PCR产物得以2n的批数形式迅速扩增,经过25~30个循环后,理论上可使基因扩增109倍以上,实际上一般可达106~107倍。