SOD提取过滤后该怎么采集?

来源:百度知道 编辑:UC知道 时间:2024/05/22 00:47:38
SOD提取后,过滤到滤纸上,该怎么采集?

1.丙酮提醇:向滤纸中加0.8倍量预冷(-15度 ) 丙酮 ,将滤纸捣碎,放出SOD, 生成大量白色沉淀 , 以3000r/min离心2分钟收集沉淀,上清液可不必吸取,直接倾倒.

2.热变性:(除杂蛋白)准备好衡温浴锅,在本工艺中,提前30分钟, 注满水接通电源后,使之加热到55--60度以省时间,将沉淀量约50倍量体积比加入0.2MPH=7.6磷酸钠缓冲溶液,水浴加热至60度,15分钟后迅速冷却到室温.3000r/min离心2 分钟得上清液,在上清液中,缓缓滴加0.6倍体积的预冷(-15度)丙酮,生成白色沉淀

3.初纯SOD:在上述沉淀中加去离子水,制成20--30%SOD溶液,分装入样品瓶中,放入冷冻干燥机中,于开机后以0.2--0.1Torr真空度,约1.5--2小时, 得到化妆或食品用SOD,该产品比活大于3000u/mg,外观呈微带蓝色的白色冻干品.

干燥成晶体或是浓溶液保存。