大肠杆菌的检测方法

来源：百度知道 编辑：UC知道 时间：2024/05/04 08:10:00
各位,我请教大家一个问题，我上次做细菌培养实验，有两瓶培养基，都放在培养箱24小时，37度,也可能是42度，只有一瓶凝固，1.营养琼脂用来测细菌总数，（凝固了），2.另一是测大肠杆菌，（可能是虎红琼脂或者乳糖胆盐，前者可能性在，当时没有记清楚）紫红色的液体，没有凝固。这是为什么？如果是液体就没法测。
虎红琼脂,(在它的标签写,供霉菌和酵母菌的计数,分离和培养)能否用来测大肠杆菌?在培养箱中的温度是多少?乳糖胆盐(标签写用于多管发酵法测食品,纯净水和一次性使用卫生用品中大肠菌群,粪大肠菌群,和大肠杆菌),蛋白胨.20.猪胆盐/5.乳糖/10,溴甲酚紫/0.01,最终PH7.4,请问是单料还是双料,?温度是多少/?培养多长时间?因为是液体.怎么检测?s要测数量?实验室只是细菌计数器, 没有显微镜.

大肠菌群测定的操作细则
大肠菌群系指一群能发酵乳糖、产酸产气、需氧和兼性厌氧的革兰氏阴性无芽胞杆菌。该菌主要来于人畜粪便,故以此作为粪便污染指标来评价食品的卫生质量,推断食品中有否污染肠道致病菌的可能。
食品中大肠菌群数系以100mL(g)检样内大肠菌群最可能数(MPN)表示。
1 设备和材料
1.1 温箱：36±1℃。
1.2 冰箱:0～4℃。
1.3 恒温水浴 :44.5±0.5℃。
1.4 天平。
1.5 显微镜。
1.6 均质器或乳钵。
1.7 平皿:直径为90mm。
1.8 试管。
1.9 吸管。
1.10 广口瓶或三角烧瓶:容量为500mL。
1.11 玻璃珠:直径约5mm。
1.12 载玻片。
1.13 酒精灯。
1.14 试管架。
2 培养基和试剂
2.1 乳糖胆盐发酵管:按GB 4789.28中4.9规定。
2.2 伊红美蓝琼脂平板:按GB 4789.28中4.25规定。
2.3 乳糖发酵管:按GB 4789.28中4.10规定。
2.4 EC 肉汤:按GB 4789.28中4.11规定。
2.5 磷酸盐缓冲稀释液:按GB 4789.28中3.22规定。
2.6 生理盐水。
2.7 革兰氏染色液:按GB 4789.28中2.2规定。
3 操作步骤
3.1 检样稀释
3.1.1 以无菌操作将检样25mL(或g)放于有225mL灭菌生理盐水或其他稀释液的灭菌玻璃瓶内(瓶内予置适当数量的玻璃珠)或灭菌乳钵内,经充分振摇或研磨做成1:10的均匀稀释液。固体检样最好用均质器,以8 000-10 000 r/min的速度处理1min,做成1:10的均匀稀释液。
3.1.2 用1mL灭菌吸管吸取1:10稀释液1mL,注入含有9mL灭菌生理盐水或其他稀释液的试管内,振摇试管混匀,做成1:100的稀释液。
3.1.3 另取1mL灭菌吸管,按上条操作依次做10倍递增稀释液,每递增稀释一次,换用1支1mL灭菌吸管