KSOM培养液的主要成分是什么

来源:百度知道 编辑:UC知道 时间:2024/05/29 03:54:54
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1):血清:血清是胚胎培养中添加的主要蛋白质源物质,它在保持细胞的存活、促进生长、维持细胞pH及渗透压的稳定、增加细胞弹性及膜的完整性等方面都发挥着重要作用,但血清组成复杂,包括生长因子、激素、维生素、矿物质、细胞因子以及其他一些还未确定的物质。血清成分的多样性决定了它对胚胎的影响也是复杂多元的。血清的存在对胚胎的最初发育有损害作用,而对后期胚胎的发育有利,因此在许多研究中血清是在胚胎培养48~72h后加入。
牛血清白蛋白(BSA)是培养液中常用的一种蛋白源物质,能结合培养液中的一些胚胎毒性物质,对胚胎有保护作用,它也能增加胚胎中的细胞数量。单独使用BSA并不能完全取代血清的作用,说明血清中其他一些有用因子不包括在BSA中。血清存在的情况下,BSA的加入能促进胚胎的发育。但是一定注意的是:一定要用无脂肪酸的BSA一般在0.3-0.8%
(2)生长因子与细胞因子:目前比较确定的是IGF-I、IGF-II及EGF及其受体基因在早期胚胎中表达,说明自然情况下,IGF、Insulin在胚胎发育中有作用。体外培养液中加入IGF-I或Insulin能阻止细胞凋亡,促进细胞的增殖,对胚胎的发育有利。EGF是血清和卵泡液中都存在的生长因子,无血清培养液中加入EGF能促进牛胚胎的发育,增加蛋白质的合成和囊胚的孵化。
(3)其他成分:体外培养液中加入氨基酸有利于克服胚胎的发育阻滞,不仅能促进胚胎的早期发育,而且增强其植入后的发育能力。胚胎致密化之前,必须氨基酸没有作用,甚至对胚胎发育产生副作用。但必需氨基酸对后期胚胎的发育有促进作用,主要表现在增加内细胞团细胞分裂率和植入后胎儿的发育能力。非必需氨基酸和谷氨酰胺对致密化后期胚胎的发育也有利,能促进胚胎向囊胚的发育和胚泡的形成,并增加滋养层细胞的数量和囊胚的孵化能力。
注:在添加成分中,如果用sigma的一定要看是经过细胞检测过得,这样的获号才可以应用到胚胎上。在配置培养液时pH也是应该注意的。