生物化学应用题

来源：百度知道 编辑：UC知道 时间：2024/06/05 19:05:00
当一种4肽与FDNB反应后,用5.7mol/LHCl水解得到DNP-Val及3种其他氨基酸;当这4肽用胰蛋白酶水解时发现有两种碎片段;其中一片用LiBH4还原后再进行酸水解,水解液内有氨基乙醇和一种在有浓硫酸条件下能与乙醛酸反应产生紫(红)色产物的氨基酸.试问这4肽的一级结构是由哪些氨基酸组成?

分析：FDNB即2，4-二硝基氟苯，在弱碱性溶液中可与肽链N-末端的氨基酸生成黄色的二硝基苯氨基酸（DNP-AA）。盐酸水解可以打开所有的肽链，是蛋白质或者多肽变为游离的氨基酸。LiBH4还原羧酸成为醇类，可使C-末端AA还原为相应的氨基醇。胰蛋白酶可专一性水解由碱性氨基酸（lys，Arg）羧基端形成的肽键。
解题：1.因为FDNB反应后经5.7mol/LHCl水解得到DNP-Val及3种其他氨基酸，所以N-末端是Val。解出：Val·-·-·-。
2.其中一片用LiBH4还原后再进行酸水解,水解液内有氨基乙醇，Gly是氨基乙酸，因此C-末端是Gly。浓硫酸条件下能与乙醛酸反应产生紫(红)色产物的氨基酸是Trp。解出：Val·-·Trp·Gly
3.当这4肽用胰蛋白酶水解时发现有两种碎片段，所以水解此肽键-COOH末端是Lys或者Arg。解出：Val·Lys·Trp·Gly或者Val·Arg·Trp·Gly
答案：Val-Lys或Arg-Trp-Gly