如何鉴定食物中含有核酸?

来源:百度知道 编辑:UC知道 时间:2024/05/05 02:18:13
如题帮下忙,这是生物课作业,很扯的一个命题,找了半天没找到…………

(一)甲基绿—派罗宁法鉴定DNA、RNAJ

[原 理]

核酸分子因含有磷酸根呈酸性,它们对碱性染料甲基绿和派罗宁具有亲和力,但这两种碱性染料具有选择性。RNA易被派罗宁染成红色,而DNA被甲基绿染成绿色,故可用来鉴定核酸。

[器材与试剂]

器材:显微镜、载玻片、盖玻片、烧片、培养皿、吸管、镊子、刀片或切片机、分液漏斗等.

试剂: (1)甲基绿的精制:市售的甲基绿中含有甲基紫,甲基紫溶于氯仿,可用萃取法除去甲基紫,方法:先配制2%甲基绿水溶液,置于分液漏斗中,然后加氯仿洗涤数次,弃除氯仿,反复多次直至氯仿层中不显紫色,水层备用。

(2)派罗宁的精制:先配制5%水溶液,置于分液漏斗中,用氯仿洗涤数次,待氯仿不显红色为止,弃除氯仿水层备用。

(3)0.2mol/L醋酸缓冲液,pH4.8(0.2mol/L醋酸40ml+0.2mol/L醋酸60ml)。

(4)甲基绿—派罗宁溶液:1ml2%甲基绿水溶液+1.75ml派罗宁水溶液+pH4.80.2mol/L醋酸缓冲液25ml+水25ml,混合液可保存一周。

[方法与步骤]

1.撕取马铃薯嫩茎的表皮或洋葱鳞茎表皮(12层细胞),或制作待鉴材料的切片。

2.把表皮或切片置于载玻片上,加甲基绿—派罗宁溶液(以浸没材料为宜),染色1520分钟。

3.用蒸馏水洗去多余的染液(如染色太深,可用70%乙醇洗涤)。

4.用滤纸吸干水分,用丙酮脱水及分色,20分钟后镜检。

结果:细胞核(DNA)被染成绿色,其中核仁(RNA)被染成红色。

(二)孚尔根法鉴定

[原 理]

在酸性环境(1NHCl,60℃)中,DNA的脱氧戊糖转变为醛的形式,锡夫试剂与醛基反应,产生紫色化合物,此反应可特异地显示核中的DNA。

[器材与试剂]

器材:器材同前。

试剂:(1)锡夫试剂(配法见前)。

(2)