请详细讲解一下Cre/LoxP重组系统的机理和应用范围！

Cre/LoxP系统构建TIGR、OPTN基因时空特异性打靶载体； 方法 在通用型时空特异性打靶载体pflox的基础之上，利用分子克隆技术，将TIGR、OPTN基因组序列C端功能域置于两个方向相同的LoxP序列之间，将其5’端和3’端序列作为5’同源长臂和3’同源短臂,将neo、tk正负筛选基因置于内含子中，从而避免筛选基因干扰TIGR、OPTN基因转录后拼接；结果 经限制性内切酶、PCR、测序鉴定，确定构建了5’同源长臂为3.6kb，3’同源短臂为2kb，第三外显子位于两个loxP序列之间的TIGR基因时空特异性打靶载体， 以及5’同源长臂为2.5kb，3’同源短臂为2.7kb，第四、五外显子位于两个loxP序列之间的OPTN基因时空特异性打靶载体。结论 利用Cre/LoxP系统成功构建了TIGR、OPTN基因时空特异性打靶载体，为进一步构建TIGR、OPTN基因时空特异性基因敲除小鼠奠定基础。本课题获国家自然科学基金（30300380）、广东省自然科学基金重点项目（36649）、广东省教委基金资助

Cre/loxP recombination system

Cre is a 38 kDa recombinase protein from bacteriophage P1 which mediates intramolecular (excisive or inversional) and intermolecular (integrative) site specific recombination between loxP sites (see review article by Brian Sauer in Methods of Enzymology; 1993, Vol. 225, 890-900).

A loxP site (locus of X-ing over) consists of two 13 bp inverted repeats separated by an 8 bp asymmetric spacer region (Diagram)

One molecule of Cre binds per inverted repeat or two Cre mo