设计一个研究某一植物生理问题的实验方案

洋葱根尖有丝分裂染色体标本制备及观察[细胞遗传]

一、实验目的和要求
本次实验通过对植物根尖的制片和观察, 要求学生初步学会对植物组织、细胞的固定、离析和压片方法，了解有丝分裂的全过程及其染色体的动态变化情况,掌握有丝分裂各时期的特征。

二、实验原理

有丝分裂是细胞均等增殖的过程, 是体细胞分裂的主要方式.在有丝分裂过程中.细胞内每条染色体都能复制一份, 然后分配到子细胞中,因此两个子细胞与母细胞所含的染色体在数目,形态和性质上均是相同的，在各种生长旺盛的植物组织中均存在着有丝分裂。

三、实验用品

洋葱 改良苯酚品红 1N Hcl (浓HCl82.5ml→1000ml)

附：改良苯酚（石炭酸）品红染液

（见：遗传学实验--第二版，刘祖洞，江绍慧编。P.209）

母液A：取3g碱性品红，溶解在100ml的70％洒精（可长期保存）。

母液B：取母液A10ml，加入90ml的5％苯酚水溶液。

苯酚品红：取45ml的母液B，加入6ml冰醋酸和6ml 37％甲醛。

改良苯酚品红：取2-10ml 苯酚品红染液，加入98-90ml 的45％冰醋酸和1.8g山梨醇即可。改良苯酚品红配成后可立即使用，但着色能力较差，一般在配制两周后染色能力显著增加。

四、实验方法

1、取材：大蒜、洋葱根尖，恒温箱

2、预处理：药物处理（秋水仙素）或冷冻处理（冰箱）

3、固定：卡诺氏固定液

4、解离： 恒温水浴锅，1N盐酸或0·5％的果胶酶和纤维素酶

5、染色及压片：染色液（改良苯酚品红或醋酸洋红），载玻片、盖玻片

6、染色体观察：显微镜

7、永久封片（示范）：二甲苯、中性树胶

五、注意事项

(1)取材：取分生区，尽量要小；(2)解离要软，水洗要彻底，