感受态 转化

来源:百度知道 编辑:UC知道 时间:2024/05/29 08:49:58
最近做转化一直不太顺利,最近一次转化结果菌落生长很密,而且较小,没有蓝斑,检测无阳性。请经验丰富者帮忙分析一下原因。
有没有分子生物学的论坛推荐一下。 非常感谢~

最近我们也在作感受态细胞转化
做转化时一定要注意用冷的氯化钙,还可以在加入后42度热休克90秒,这样效果比较好。
筛选时我们用的质粒中有氨卞霉素的抗性,所以只是在培养基中加入氨卞霉素就成了。但是蓝白筛选不是白色的是转入质粒的么?篮斑是没转入的啊。

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菌落生长密,显然是稀释度的问题。
至于无阳性,最大的可能是感受态细胞制备,如果可能,直接购买公司制备好的感受态细胞吧;其次可能就是转化的条件;
建议你看看分子克隆实验指南第三版.