溶液的均一性是指什么?

来源:百度知道 编辑:UC知道 时间:2024/04/28 22:25:54

1 核酸变性
?核酸的变性主要指DNA的变性。核酸变性时双链间的氢键断裂成单链,但并不涉及共价键的断裂。引起DNA变性的因素很多,如高温引起的热变性,酸碱改变引起的酸碱变性等。
?2 DNA热变性现象
?当把DNA的稀盐溶液加热到80℃~100℃时,双螺旋结构即发生解体,两条链分开形成无规则线团。同时,一系列物化性质发生改变:260nm处紫外吸收值升高,粘度降低,浮力密度升高。由于二级结构的丧失,也失去了部分或全部生物活性。
?3 增色效应和减色效应
?当DNA分子加热变性后,其260nm的紫外吸收会急剧增加的现象称为增色效应。变性DNA复性后,在260nm处的吸收值减少的现象称为减色效应。
?4 DNA的复性
?变性DNA在适当条件下,又可使两条彼此分开的多核苷酸链重新结合成为双螺旋结构,以上过程称为复性。复性的条件是:(1)变性DNA只有在缓慢冷却时才能复性。如果DNA在沸水浴中加热数分钟后,骤然在冰浴中冷却至低温,DNA不能复性,这也是防止复性的方法。(2)DNA浓度愈大,复性愈快。(3)DNA片段愈长,复性也愈快。
?5 核酸分子杂交
?DNA杂交是指不同来源的DNA经热变性后,在慢慢冷却的复性过程中,由于异源DNA之间的某些区域有相同的序列,可以彼此结合形成杂交分子,称此方法为DNA分子杂交。DNA也可与互补的RNA之间发生杂交,形成DNA—RNA杂交分子。
?核酸杂交可在液相或固相上进行,由于硝酸纤维素膜只吸附变性DNA,故常用硝酸纤维素膜作核酸杂交的支持介质。
?6 如何应用核酸的紫外吸收
?由于嘌呤和嘧啶在240nm~290nm紫外线处表现出强烈的吸收性能,所以可以利用紫外分光光度计测定碱基、核苷、核苷酸和核酸,它们的最大吸收峰值在260nm附近。不同核苷酸有不同的吸收特性,可以此作定性定量检测。
?在研究中常用紫外分光光度计检测少量的DNA和RNA,纯样品和不纯样品的检测根据是:
?纯DNA:OD260/OD280=1.8
?纯RNA:OD260/OD280=2
?样品中如含杂蛋白及苯酚(它们在紫外也有吸收),比值明显降低,故不纯样品不能用此法定量。