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来源：百度知道 编辑：UC知道 时间：2024/05/21 19:46:49
Here, we analyze the molecular mechanisms that determine the temporal patterning of a subset of MyoD regulated genes. We show that Mef2 expression and p38 activity increase in response to MyoD. Binding of MyoD and Mef2 proteins at late-stage genes is temporally delayed until there is sufficient activity of p38. Transcription of this subset of promoters is further delayed until the Mef2D isoform joins the complex and then recruits Pol II. The expression of this subset of normally lateexpressed genes can be shifted to an earlier time relative to other MyoD targets by the precocious expression of Mef2D and an active p38 kinase. This demonstrates that a MyoD-generated feed-forward regulatory circuit, wherein factors induced by MyoD feed-forward to regulate MyoD activity at subsequent target genes, acts to temporally pattern the relative timing of gene expression during skeletal myogenesis.

Results and Discussion
p38 and Mef2D regulate the timing of a subset of genes during

在这里，我们分析的分子机制，确定颞图案化的一个子集MyoD的调节基因。我们证明了mef2表达和p38活性增加，反应MyoD的。装订MyoD的和mef2蛋白质在晚期基因是暂时性的延迟，直到有足够的活性p38的。转录本的子推动者是一拖再拖，直到mef2d亚型加入复杂的，然后在新兵油料二。表明此子通常lateexpressed基因可转移到一个较早的时间相对于其他MyoD的目标早熟表达mef2d和一个积极p38激酶。这说明MyoD的产生前馈调节电路，其中因素诱导MyoD的前馈调节MyoD的活性，在随后的靶基因，行为，以暂时性的格局相对时机基因表达在骨骼肌肉发生。

结果与讨论
p38和mef2d调控时机的一个子基因在肌肉

我们先前发表的微阵列分析中的应用MyoD的儿表明前期诱导mef2亚型和其他的因素，参加在生肌计划（安大略等人2002年） ，与许多其他研究，在成肌细胞系。北部和西部的分析证实，表达双方的mef2a和mef2d增加响应MyoD的儿（图1B ）条。迟钝凝胶的流动性，这些蛋白质在稍后的时间点，显示上升的磷酸化，以及治疗的细胞与P38的抑制剂SB203580防止出现hyperphosphorylated mef2 ，表现出一个MyoD的诱导活化的p38和随后的p38的依赖性磷酸化mef2a和mef2d 。此外，在体外激酶检测显示，无论mef2a和mef2d直接磷酸化P38的（数据未显示） 。

我们事先微阵列研究表明，抑制P38的结果是减少了表达的一个子集MyoD的靶基因。这种作用是有选择性的基因表达，通常在第二天的肌性纲领，建议一个潜在的作用，为p38的调节时机的基因活化。为验证这一假说，我们评估MyoD的诱导基因表达细胞precociously高架P38的活动，所取得的表达mkk6e ，活化等位基因的P38的上游调节器（韩等， 1996年） 。阵列分析基因表达，在24小时以下MyoD的儿感应确定的一个子集的基因，更高效表达，在存在活跃的P38的（褶皱变化> 2 ×和Q < 0.10 ;补充表1 ） 。相比，与我们先前的研究中，有能力的MyoD的诱使这一套基因也能抑制由SB203580干预性（ P = 0.003 ） ，显示水平p38的活性调节myodmediated表