单酶切和双酶切的定义分别是什么？它们有什么不同？

来源：百度知道 编辑：UC知道 时间：2024/05/13 05:19:14
做实验的时候要把400bp目的片断连到pcDNA3.1(+)质粒中去：单酶切质粒后用T4 DNA连接酶连接，转化到感受态细菌去，涂板有细菌生长，用目的基因的引物做PCR，产物电泳获得目的条带。这个步骤有没有问题？听说要用双酶切。两者有什么区别？

单酶切就是只用一个限制性内切酶去切你的质粒，环状的质粒就成为线状的了，但质粒的大小不变
双酶切用两个限制性内切酶，质粒上就产生了两个缺口，环状质粒就变成两段线状DNA了。回收你需要的那一段，因为它的两端和你的目的基因带有互补的黏性末端（当然目的基因也要用这两种酶切才行），在T4DNA连接酶在作用下，它们就连到一起了。

你该看看《生物化学》或基因工程方面的书。这都是基本的知识啊。