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来源:百度知道 编辑:UC知道 时间:2024/05/27 16:27:38
2.3. Colony count analysis for the candidacidal activity of di-K19Hc
100 ll of a predetermined concentration of di-K19Hc was mixed
with 1 ml aliquots of yeast-phase C. albicans (3 · 107 colony forming
units/ml, CFU/ml), in 10 mM sterile sodium phosphate buffer (pH
7.4). The mixtures, in final volumes of 1.1 ml, were then incubated in
a shaking incubator at 30 C, and 100 ll aliquots were removed at predetermined
intervals. Each of the aliquots directly or after dilution was
plated on SDB agar consisting of 1% agarose and 3% SDB powder in
10 mM sodium phosphate buffer, at neutral pH. The resultant colonies
were then counted, after being incubated overnight at 30 C.
2.4. Potassium efflux
The K+ efflux from the di-K19Hc-treated C. albicans cells was measured
with An Istek model 735 pH/ISE meter, fitted with a potassium
ion electrode (pHoenix Electrode, USA), as was described in the study
of Orlov et al. [22]. In brief,

2.3 。菌落计数分析,为candidacidal活动涤k19hc
100名当地雇员的一个预定的浓度涤k19hc好坏参半
与1毫升aliquots酵母相白念珠菌( 3 107集落形成
单位/毫升,对CFU /毫升) ,在10毫米无菌磷酸钠缓冲液( pH
7.4 ) 。该混合物,在最后卷一点一毫升,然后在孵育
一摇头孵化器在30 C和100名当地雇员aliquots被拆除预定
间隔。每一项aliquots直接或稀释后,被
镀对康体发展局的琼脂构成的1 %琼脂糖和3 % ,康体发展局的粉末在
10毫米钠磷酸盐缓冲液,在中性pH 。由此产生的殖民地
当时清点后,孵育,一夜之间在30长
2.4 。钾排
的K +外流的直接投资- k19hc治疗白色念珠菌细胞测量
与一istek模型735 pH值/伊势米,装有一钾
离子电极(凤凰电极,美国) ,正如所描述的研究
对orlov等人。 [ 22 ] 。简单来说,白色念珠菌kctc7122细胞培养
一夜之间在50毫升的康体发展局,在30三,细胞洗涤3
倍,与10毫米钠磷酸盐缓冲液, pH值7.4 ,和resuspended
在浓度三点五一零七细胞/毫升,在相同的缓冲区。一毫升
aliquots这些白色念珠菌悬浮液,然后孵育
100名当地雇员的涤k19hc ( 1毫克/毫升,在0.01 % ,乙酸)的30 C ,预定
倍。后30 - S的spindown在12000 rpm的,九毫升蒸馏
水被添加到上清液中的每个样本。总
钾离子流出,当时确定的,由于浓度的钾离子释放
从白色念珠菌后中断的样品经长时间
超声波( 3分钟在60 %功率:格拉¨特型威斯康星大学2200年,班得利
电子,柏林,德国) 。这些实验重复5
倍,平均值分别利用在建造该
图。该% ,钾离子释放,当时的计算方法,根据该
以下方程:钾离子释放( % ) = ( [钾]样本[钾]肽
自由控制) / (钾100 %的控制[钾]肽自由控制)
100 。