SDS-PAGE中蛋白质的变性

来源:百度知道 编辑:UC知道 时间:2024/05/31 01:34:57
在做WB的过程中,用加热的方法使蛋白变性,但是结果做出来出现了杂带,我想知道还有什么方法能使蛋白更彻底的变性?谢谢!

杂带主要原因可能是抗体特异性问题,你可以通过调节抗体稀释浓度,蛋白上样量,曝光时间等等条件试图降低杂带。不可能是变形不彻底所致。
再者,如果你的蛋白发生降解(特异位点),那么同样也会有杂带,这样情况避免方法可能在蛋白溶液中加入蛋白酶抑制剂,EDTA等药品试图改变

试试重金属盐,可是后期除盐可能比较麻烦

加重金属盐,有机溶剂,尿素,有很多的吧!