为什么有的在跑电泳之前,PCR产物要在94°C变性5min,作用是什么呀

来源:百度知道 编辑:UC知道 时间:2024/05/29 00:05:19

电泳的目的是看DNA片段的长度,而电泳上DNA移动速度除了受片段长度的影响还受到其结构的影响.

让DNA变性,所有样品都是线形DNA。 这时所有电泳上所有DNA的移动速度只和其长度有关。

破坏DNA的高级结构~`即它的空间结构~

这叫做预变性。因为此时模板DNA以双链形式存在,这时后整个体系是最稳定的。因此需要94度5~10min钟来解开模板的双链。以后过程中,是具有模板和引物的杂合双链,较不稳定,因此94度几十秒进行解链即可。

94°C变性,为了使DNA双链变为单链,之后单链DNA与“引物”结合,从而合成新的双链。接下来再“变性”,经过循环即可得到大量扩增产物。

破坏dna空间构型,使它变成线性结构