PCR出现很多条带，

来源：百度知道 编辑：UC知道 时间：2024/05/29 13:15:57
我做BAC文库的着丝粒筛选，根据文献中着丝粒的保守序列设计了引物，做PCR，但几乎每个克隆都有条带，提高退伙温度也不行，太多了，根本无法分析，而且用空载体作阴性对照也有条带，做了多次还是一样，不知道各位有没有做着丝粒方面的，
程序：95度 5min 94 30s 60 60s 72 90s
体系：25ul 水18.5 buffer 2.5 E 0.5 dNTP 0.5 p1 p2 各1ul

你没写底物是多少.

如果阴性对照也有很多带的话,是引物设计的问题.最好有图,否则不好分析啊.

如果只是正常体系太多带的话,可能是你的底物能pcr的东西太多了

如果阴性对照也有很多条带的话，恐怕只能是引物设计的问题了，可能有false prime的地方，也可能是引物二聚体比较多。

但看你的体系，没有什么大的问题，不过你好像没写template用了多少？少放点template是有好处的。