PCR产物比目的条带大？？？？？？

来源：百度知道 编辑：UC知道 时间：2024/05/17 01:58:46
最近用细菌通用引物扩pcr,得到的产物跑电泳时，得出来的条带比目的条带要大，为什么会出现这种问题啊？
很郁闷，实验真的是一筹莫展了，马上就放假了，那位高手指点一下，让小弟过一个快乐的春节，小弟在这不胜感激！！！
50ul体系，引物各1ul，dNTP 5ul,pcr buffer 5ul,taq酶0.25ul，模板2ul，补水至50ul.
反应条件：94度 5分钟，（94度 1分钟，50度 1分钟，72度 1分30秒，）（30循环），72度5分钟

大很多吗？有时候电泳跑出来的带和MARKER对不上，但是送去测序的时候是没有问题的。
要是你扩的很纯没杂带的话，干脆花几十块钱送去测序，反正现在测序也不贵。

也有可能是你的引物的特异性不强

可能是你的引物浓度过高啦。你是跑多少微升体系的 啊？

是不是引物出问题了??