用PCR产物直接送去测序的时候,那产物的量究竟要多少合适?

来源:百度知道 编辑:UC知道 时间:2024/05/17 01:51:49
我发现不同的公司要求不同的量,这个量少点多点会对测序结果影响很大吗?还有,选择测通是不是一个反应就可以了?两个反应是不是就意味着双向测?

PCR产物还需要纯化,纯化过程会有点损失,同时不同公司的仪器不同,技术力量不同,可能对量的要求也有些不一样吧

PCR产物,如果条带单一,也比较亮,那就给他们一半左右好了
测通就是双向测过去直到重合,具体要多少个反应,就看仪器测序长度和你基因长度了

不同的公司要求的量不同,主要是他们使用的测序仪对产物的进样量的要求不同。如果量太少的话肯定不行。

在测序的时候,序列越长,误差越大。所以对于比较长的基因序列一般要用2个或更多的反应。是不是双向测倒不一定,不过一般都采用双向测序的方法。

用几个反应主要看你对精度的要求,以及你扩增基因的长度。