sds-page 跑了n次。marker条带清晰，但是样品没有条带。这是怎么回事啊？

来源：百度知道 编辑：UC知道 时间：2024/05/28 02:21:02
跑了n次了。用考马斯亮蓝测了样品中是有蛋白含量的。但是跑完后在浓缩胶中也没有条带。
主要是我看分离胶里没有蛋白，我就想会不会在浓缩胶里。所以给浓缩胶也一起染色的。上样缓冲液用的是2倍的买的蛋白marker上说明书上说的那个配方。用的就是20UL蛋白提取液20ul的上样缓冲液。

首先，我建议你到丁香园或者说中国生命科学论坛发帖求助，能更快得到答案。
其次，你的问题说的不太清楚。譬如说你测得的蛋白浓度是多少呢？你有跟BSA标准曲线比对一下么？会不会是蛋白浓度太低需要浓缩呢？也有可能说你的分离胶和浓缩胶的浓度不适合你的蛋白。另外你跑的是什么蛋白呢？是比较纯的蛋白还是全蛋白呢？如果说全蛋白的话没有条带，又有可能是你样品处理的问题了。有可能的话发张图上来帮你看看。
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能否说下你的蛋白样品是如何处理的？是用什么办法提取的蛋白？
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看了楼下说的，我觉得你说的确实有问题，按说浓缩胶里是不会有蛋白条带的，我染色也从来都是把浓缩胶去掉的。应该是染色分离胶啊。看了你提取蛋白的步骤，我觉得也没有什么问题吧，你样品是怎么处理之后点样的？加1/4体积的5倍loading buffer么？
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实在是看不出来问题所在。。。。有空把你的图发到我邮箱 我想看看你的图。
tanzhen613@163.com

样品里面压根就没有蛋白质呗

浓缩胶里当然没有条带了 ，条带在分离胶里。
可以尝试下银染色，灵敏度远高于考马斯亮蓝染色

可能蛋白太浓了，一煮都沉淀了。

应该是蛋白质的问题