sds-page电泳出现问题

来源：百度知道 编辑：UC知道 时间：2024/05/17 01:31:21
做肌肉蛋白SDS-PAGE电泳，跑出来的泳带模糊不清且有拖尾的现象，原本应该显示的泳带没有显示出来，或者显示出模糊的一块。只有一条或两条带比较清晰，其他的都模模糊糊。另外考马斯亮蓝染色液如何配制才能取得更好的染色效果（CBB-R250固体）？脱色的时候为何背景颜色不能完全褪色？
回答请具体点不要复制黏贴
貌似我说的不是很明白。哪位做过大鼠肌肉蛋白SDS-PAGE电泳的能否具体说一下方法，特别是点样的时候，我加的是DTT，上样20UL，跑到最后就是跑出3条带。其他的都没跑出来。郁闷。拜托了啊 谁帮忙我再加200分。

电泳的那个问题是不是你点DNA液的时候没点好，要么就是通电的电压没调好

脱色没完全退色是正常的，看的清楚就可以了……

补充：
那就有可能你的DNA没提的很纯，电泳分离不开来……再做遍吧，我跑过兔子跟河蚌的……应该是这个问题

1. 上样量不能太多
2. 点样孔要清洁，样品要沉到底部形成一条带
3. 浓缩胶低电压跑
4. marker如果染得很好，染料就没问题。
5. 脱色液配方及配置时间如何？如果时间长，会挥发。脱色时可稍加热。应该 能脱干净。

跑出来有拖带现象，那就是你的蛋白质杂了。

跑出的条带不明显的话应该是你提取的肌肉蛋白的浓度太低了，或者染色时间不够。

模糊是正常的吧，你跑的又不是单一的蛋白。你用蛋白marker加跑看看，如果marker不拖尾，就说明正常。
另外KAO-G一般的方法配置就好，人家都行，你也行的。
倒是脱色的时候，可以在恒温摇床上摇，隔30min换新鲜的脱色液就会很清晰了

先把图发上来看看.要不不好给你分析

考马斯亮蓝配溶液要用滤纸滤一下

在就是蛋白材料是不是有问题啊，只有三条带。重新做一下材料试试