UC知道DNA酶切产物再纯化后电泳，怎么看起来变长了？
来源：百度知道 编辑：UC知道 时间：2024/06/15 21:20:09
DNA酶切产物直接电泳，和酶切后再纯化然后电泳，
相比之下后者的条带明显靠后（变长了），这是怎么回事？
酶切的底物是经过试剂盒纯化的PCR产物，两头各有一酶切位点，
我尝试了“PCR及酶反应产物纯化试剂盒”和胶回收两种办法
纯化酶切产物，都是一样的效果——比不纯化直接电泳长了不少。
目标条带1kb左右，酶切前的底物~1kb，酶切后不纯化~1kb，
但是两种方式纯化以后都变成了~1.3kb。
特别是胶回收，我明明切的是1kb Marker条带边上的那条亮带
（只有一条亮带），但是胶回收以后就成了1.3kb左右？？？
我从来没有遇到过这种事，请问有谁知道是怎么回事？
：
当然是同一块胶上面电泳——
PCR产物（稀释4倍）、PCR产物纯化、酶切产物、酶切后试剂盒纯化、酶切后胶回收纯化，
分别是大约1kb、1kb、1kb、1.3kb、1.3kb，特别是最后这个，
我切胶的时候切的就是1kb位置的条带，胶回收以后变成1.3kb
相比之下后者的条带明显靠后（变长了），这是怎么回事？
酶切的底物是经过试剂盒纯化的PCR产物，两头各有一酶切位点，
我尝试了“PCR及酶反应产物纯化试剂盒”和胶回收两种办法
纯化酶切产物，都是一样的效果——比不纯化直接电泳长了不少。
目标条带1kb左右，酶切前的底物~1kb，酶切后不纯化~1kb，
但是两种方式纯化以后都变成了~1.3kb。
特别是胶回收，我明明切的是1kb Marker条带边上的那条亮带
（只有一条亮带），但是胶回收以后就成了1.3kb左右？？？
我从来没有遇到过这种事，请问有谁知道是怎么回事？
：
当然是同一块胶上面电泳——
PCR产物（稀释4倍）、PCR产物纯化、酶切产物、酶切后试剂盒纯化、酶切后胶回收纯化，
分别是大约1kb、1kb、1kb、1.3kb、1.3kb，特别是最后这个，
我切胶的时候切的就是1kb位置的条带，胶回收以后变成1.3kb
酶切了还变长了么，这么怪异
你是怎么判断它变长了的？最好在同一块胶上电泳，分别是
酶切前的底物、酶切后不纯化、纯化酶切产物
看它们3者之间的关系。
如果还是变长的，请高手来解决一下~~~
80分回答这种题，太少了，可以读博士的题了，回点吧。
我这儿两个生物博士，都说分太少
这得用物理化学知识来解释,纯的DNA酶切产物是带有电荷的,电泳的时候会向一个方向游动,受到水的阻力自然会变长,而不纯的时候会受到杂质的干扰不会变长,具体原因很复杂,建议你看一下物理化学有关胶体方面的书.
切得有杂带