质粒沉淀

来源:百度知道 编辑:UC知道 时间:2024/09/24 04:41:47
构建好的载体做酶切
质粒太大
每次提取的浓度很低
想先沉淀再酶切
请教高手
质粒沉淀的具体步骤
谢谢分享

质粒用等体积的酚/氯仿抽提一次,重复此步骤,加入两倍体积的无水乙醇和1/10体积的3 mol/L乙酸钠溶液后混匀,零下20摄氏度沉淀30 min后12000 r/min离心10 min,沉淀用75%乙醇洗涤一次,12000 r/min离心5 min,弃上清,沉淀自然干燥后溶于20~40微升去离子水中或者0.5 mol/L pH8.0的TE中。