要克隆一段基因,什么情况用PCR,什么情况用重组质粒分子克隆法?

来源:百度知道 编辑:UC知道 时间:2024/06/08 10:36:21
谢谢!

长片段用重组质粒克隆法。因为一般PCR无法扩增大至8Kb以上的片段。

pcr的主要意义在于随意的增加酶切位点,方便克隆。如果通过酶切质粒能产生可用的位点就不用pcr了,毕竟pcr会有突变的

该用PCR就用PCR,该用重组质粒分子克隆法就用重组质粒分子克隆法

如果经过酶切可以获得想要的目的基因和合适的粘性末端,就采用重组质粒,这样变异的可能性很少,用PCR扩增的时候,即使用高保真酶也会有万分之几的出错率,实在不行才用PCR。

PCR是大量克隆的时候才用,重组质粒分子法有更强的针对性和目标性。比如,用后者得到目的基因,如果需要更多,则用前者大量克隆。

PCR简单快速