dpni酶,加不加buffer影响大吗

来源:百度知道 编辑:UC知道 时间:2024/06/06 17:58:46

这个要视乎你的实验目的和需要消化的目标片段的量。
如果目标片段量较少,不加buffer是可以的;
如果目标片段量太多,最好还是加buffer。
此外,你还要考虑在加DpnI酶之前你对样品做了什么处理没有。如果进行了其它的操作,而且反应液的组成与DpnI酶对应的buffer系统有太大差别,最好要将前一步的反应物纯化,然后再进行DpnI消化。
举一个例子,我用质粒PCR进行定点突变,在连接反应之后直接在连接产物中加入DpnI酶消化(不需要纯化和加入DpnI的buffer)质粒模板,效果是很好的。