STMT法提取DNA的详细资料

来源:百度知道 编辑:UC知道 时间:2024/06/07 16:14:02
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STMT法提取全血DNA:

取含EDTA的抗凝全血300 μl,加入900 μl 5×STMT(按体积比1∶4灭菌双蒸水稀释),温和混匀5~6次,冰浴10 min后,8 500 r/min离心30 s,弃上清。再加入300 μl 5 mol/L异硫精酸胍,温和振荡白色沉淀物后加入Rnase A 10 μl,室温放置10 min。加入800μl 4 mmol/L NaCLO4(PH5?2)和20 μl Resin(用时需充分混匀),室温放置5 min,再次8 500 r/min离心30 s,弃上清。重复加入500 μl洗液混匀后,8 500 r/min离心30 s,弃上清两次。12 000 r/min离心60 s,吸干剩余液体,室温放置5 min,加入100 μl TE缓冲液,50 ℃保温10 min,12 000 r/min离心60 s,吸取上清,即为DNA。