琼脂为什么要冷却至45摄氏度？

设定的原因主要是考虑到一般低于40℃，培养基开始凝固（当然，凝固温度和琼脂量以及琼脂的质量有很大关系，凝固温度其实不一定），倒入培养皿中会出现块状的固体，导致最后用于培养的培养基不均匀。不均匀的培养基表面不均匀，营养成分不均衡，甚至因为琼脂的不均衡导致凝固效果不好，影响后续操作、培养以及培养物的观察、对比。
而设定为45℃操作，一方面45℃到40℃有一个比较宽的操作空间，可以比较从容的进行操作，另一方面45℃的培养基拿在手中比较不烫手。

但是，刻意设定45℃倒培养基是很僵化的，因为实际操作中不会有人专门去拿温度计测量。
在实际操作中，用手触摸装有培养基的三角瓶，自己感觉手握不烫手即可拿起轻摇（注：不可摇出汽泡），此时培养基依然呈水样就可进行倒培养基了。只要倒培养基的基体还呈水样而且没烫到自己手，这个温度范围都可以。根据实验经验，基本也就是50℃－45℃左右。

至于加抗生素之类，一般55℃以下加都不会影响药性，而且普遍选择55℃－50℃加。因为实际操作中如果真等到45℃加，还没混匀，培养基就可能凝固了。
所以加激素、抗生素一般是手握三角瓶觉得可以忍受，但是仍感到些许烫手不能完全握住的时候加，也就是比倒培养基稍高一点点的温度加。

凝固和杀菌！

冷却了才能成固体啊

高温杀菌
低温凝固

没有什么特殊意义。琼脂的凝固点在40度以下，作培养基的时候要在无菌条件下倒平板或把琼脂倒到试管里，如果温度太高，在45度以上，用手无法直接触碰装琼脂的锥形瓶，要等温度降到45度左右才可以用手直接操作。

45℃下就会发生凝固，超过45℃不好操作。并且此时如果需要添加其他成分（比如抗生素），温度过高会破坏添加物。