MRS培养基按配方配制好后，经过高温高压灭菌后，为什么出现不完全凝固现象？

来源：百度知道 编辑：UC知道 时间：2024/06/11 22:55:00
配方：蛋白胨10g，牛肉浸膏10g，酵母提取物5g，葡萄糖20g，吐温80 1ml，柠檬酸氢二铵2g，MnSO4·H2O 0.25g，MgSO4·7H2O，K2HPO4 2g，琼脂20g，蒸馏水1000ml。琼脂是后面才加的，1000ml里倒出200ml不加琼脂，另外的800ml按比例加16g的琼脂，再分成两份，两份调pH为6.2，不加琼脂那一份调pH为5.0。经过高温高压灭菌后，加琼脂的那两份出现了不完全凝固，不加琼脂的那份还出现了白色沉淀。请问各位大哥大姐，这究竟是什么原因呢？谢谢！
灭菌是在121℃高温高压下经过20min处理的。出现这样的问题，会不会是因为灭菌环境呢？培养基是前一天配制的，第二天才调的pH，然后再进行灭菌。

一楼说的问题楼主可以考虑一下。
另外，楼主添加琼脂后是否先将培养基煮沸，是琼脂充分溶解后再进行高温灭菌，如果是把琼脂分加入培养基后，直接放入灭菌锅灭菌，理论上灭菌温度足以让琼脂溶化，但是在实际操作过程中，也出现因为琼脂并为全溶，或者分散不好使得培养基不能完全凝固的情况，所以建议下次配制的时候，先将琼脂溶化并用玻璃棒充粉搅拌分散入培养基后，再进行灭菌。
至于白色沉淀的出现是正常的，原因可能有两种，其一就是高温析出，就是MRS培养基物质高温发生变化产生沉淀；另一可能就是如上所说，除琼脂外，其他物质在没有充分搅拌均匀的情况下，不会自动溶解到水中，而一直以沉淀的形式出现。

一般情况下琼脂16—20克加入1000毫升蒸馏水中煮沸溶解，过滤以后，再加试剂并补足蒸馏水到1000毫升，然后调pH，再进行灭菌。

是不是瓶子没刷干净啊，有一次我也出现了这种现象，然后彻彻底底洗了遍瓶子就好了，也再没出现这种情况