Q-PCR溶解曲线怪异图:

来源:百度知道 编辑:UC知道 时间:2024/05/18 04:52:38
请问为什么左边这么高?
这是溶解曲线图

染料法的?大概引物特异性不好,有杂带或者二聚体,把反应板里的样跑个胶看看是不是,是的话就换引物吧

我在国外学生物, 你这个Q 是 quantity 的意思吗? 是不是和 real time PCR 一个意思?

这位仁兄, 你这个实验挺怪的, 我弄不懂它的原理, 综坐标代表什么? 为什么到最后还掉下来了? 如果纵坐标只是产物的荧光强度的话,它不会往下掉。 反正原理我想不通。 不过可能的是,你的primer 也可发出荧光,一开始的荧光是它发出的。 它被用掉了, 所以第一个峰掉下来。 然后第二个峰是产物。但是它为什么最后也会下来?是记录方法的问题吗? 仔细分析一下原理, 就能做出推断。

不要告诉我你的图是从右向左读吧?

有一篇中文的文章, 可能有所帮助。
http://biotech.ustc.edu.cn/upimg/training/200709/RTPCR.pdf

-----晕了, 怎么是溶解图线, 完全不懂。

q-PCR就是定量PCR,RTPCR是定时PCR
他们是不一样的,但是同样有定时定量PCR,Q-RTPCR

所谓的实时荧光定量 PCR 就是 通过对 PCR 扩增反应中每一个循环产物荧光信号的实时检测从而实现对起始模板定量及定性的分析。在实时荧光定量 PCR 反应中,引入了一种荧光化学物质,随着 PCR 反应的进行,PCR 反应产物不断累计,荧光信号强度也等比例增加。每经过一个循环,收集一个荧光强度信号,这样我们就可以通过荧光强度变化监测产物量的变化,从而得到一条荧光扩增曲线。

具体分析,我还未做这个实验,过段时间,学习完以后帮你看看