PCR扩增和菌体内扩增DNA有何区别?

来源:百度知道 编辑:UC知道 时间:2024/06/05 22:47:59
像大肠杆菌体内扩增DNA,目的不就是扩增吗?而PCR同样可以达到扩增的目的,而且方法还要简洁一些。为什么菌类体内扩增的方法还保留了??
难道菌体内DNA扩增还有一些别的目的?不仅仅是扩增?谢谢

当然有别的目的。

举个最常见的例子,对未知序列进行测序。

你确实可以通过PCR把整段基因都扩增出来,但是因为现在测序的技术限制,DNA片段两端的序列是测不出来的,直接PCR产物测序的结果只能获得基因中间部分序列。所以我需要利用细菌的T载体进行TA克隆,把基因整合到质粒上扩增,然后用质粒上的引物再PCR,让我们的整个目的基因成为新一轮PCR产物的中间部分,这样再测序就能够获得整个目的的全长序列。

另外,PCR扩增平均每1000个碱基就有两个错误,保真性远不及菌体内复制。

  区别:
  对未知序列进行测序,可以通过PCR把整段基因都扩增出来,但是因为现在测序的技术限制,DNA片段两端的序列是测不出来的,直接PCR产物测序的结果只能获得基因中间部分序列。所以利用细菌的T载体进行TA克隆,把基因整合到质粒上扩增,然后用质粒上的引物再PCR,让整个目的基因成为新一轮PCR产物的中间部分,这样再测序就能够获得整个目的的全长序列。
另外,PCR扩增平均每1000个碱基就有两个错误,保真性远不及菌体内复制。

PCR扩增只能扩增片段,不能整个复制
高中的书上没有介绍PCR的具体方法,只是简单描述了一下,其实PCR需要很多东西的 ,成本也很高

基因变异绝对不是体内扩增的目的
真正用于扩增目的的时候,要求准确性越高越好,怎么会希望有变异呢。再说PCR扩增错配的概率更大,变异更多

PCR扩增只能扩增片段,不能整个复制
高中的书上有在选修3上,PCR成本高。 在细菌体内DNA还有可能发生变异,可能看见更好的变异品种!反而PCR没这变异的可能!

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