调慢HPLC流动相流速,可减少杂质峰对目的峰的干扰?

来源:百度知道 编辑:UC知道 时间:2024/06/08 18:17:56
HPLC调慢流动相流速,可减少杂质峰对目标峰的干扰?
待测样品中A、B两种物质,流速1ml/min,调节成0.5ml/min,两物质保留时间分别延长,A、B保留时间差也加大了,就是说流速慢,A、B峰距离拉得较开。
问:(1)流速慢,色谱峰峰宽是否变宽?(2)流速慢,峰之间距离拉开了,可减少杂质峰对目标峰的干扰,对吗?流速越慢越好吗?

降低流速,理论板数会提高,分离度也会改善,这是符合色谱理论的,但对LC来说,并不是个好办法,一是效果不明显(因为可调的范围比较小),二是会付出时间的代价,工作效率降低。
减少杂质峰对目标峰的干扰,实际上就是要改善分离,在保证不犯低级错误的情况下(如柱连接不当,产生死体积;样品溶剂不合适,产生柱头展宽等等),最有效的方法是:1.改变流动相的比例和(或)组成,2.改变柱温,3.换柱子。

降低流速,可以使两物质的保留时间显著延长,也就是两物质在柱上的保留增强,因此两物质的分离度应会有一定的提高,但是由于保留时间变长所有纵向扩散会明显增加,表现为色谱峰变宽。分离度增加可以减少干扰峰对样品的干扰,但是流速慢会使峰变宽,使柱效明显下降,延长了分析时间。所以色谱方法的目标,使分离度达到1.5以上,尽可能的提高分析速度。