什么是“连接反应介导的PCR”

来源:百度知道 编辑:UC知道 时间:2024/06/05 20:14:55

你说得是LCR技术吧?
合成一对引物A、B,覆盖靶序列。经退火与靶序列结合后,A、B间留下一个缺口(nick),加入连接酶封闭缺品,两引物成靶序列完整的互补链。如果靶序列中有点突变,引物不能与靶序列精确结合,缺口附近核苷酸的空间结构发生变化,连接反应不能进行,变性后引物仍是两个。

LCR的特异性首先取决于引物与模板的特异结合,其次Taq连接酶作用的特异性,即Taq连接酶是否仅连接与靶序列完全互补的引物。实验表明Taq连接酶的非特异活性是较低的(<1%)。控制模板、酶的浓度,使反应在接近Taq酶的温度下进行,还可进一步降低非特异连接率。Barany用这一技术,将极少量(<200个分子)的βA、βC和βS区别开来。

LCR的扩增效率与PCR相当。由于有很高的信噪比,其敏感性也很高。用Taq连接酶做LCR只在两个保温点的循环(94℃、1min和65℃、4min)。产物检测也非常方便、敏感。因此可以说LCR是目前检测已知序列中有无点突变的最佳方法。

PCR技术是指大量生物体外合成DNA的技术,
它需要一个引导的引物在复制过程中;
如果楼主没打错字,
应该是这样。。。

PCR,聚合酶链式反应的简称,是一种分子生物学技术,用于放大特定的DNA片段。可看作生物体外的特殊DNA复制。
PCR反应时,只要在试管内加入模板DNA、PCR引物、四种核苷酸及适当浓度的镁离子,DNA聚合酶就能在数小时内将目标序列扩增100万倍以上。
整个PCR过程的全过程,即DNA解链(变性)、引物与模板DNA相结合(退火)
、DNA合成(链的延伸)三步,可以被不断重复