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来源：百度知道 编辑：UC知道 时间：2024/06/15 07:28:55
Before embarking on the use of primary cells it is important to establish that there is no alternative in vitro technique (i.e. biochemical tests or assays that employ continuous cell lines) that could provide data of a similar value.
Preparation
Primary cultures can be successfully established from tissue explants. However, in order to produce bulk primary cultures for experimental work it is more usual to disaggregate tissue samples to yield a cell suspension that can form a cell monolayer under appropriate culture conditions. It is important to remember that the success and reproducibility of primary cell culture also depends on the source of the original tissue and key parameters are: species, age, sex, tissue type and disease status. Furthermore, it is important to have established that the species of origin matches the characteristics desired in the intended in vitro model.
Embryonic tissues will often contain different cell populations to those found in the equiva

在开始着手主要细胞的使用之前建立是重要的没有可以提供相似的价值数据的 vitro 技术 ( 也就是雇用连续的细胞线的生物化学的测试或化验) 的替代选择。
准备
主要的文化能从薄的纱织品成功地被建立将生物的活组织移植于培养基中培养。 然而，为了要为实验的工作生产大量的提名候选人的预选会文化不聚集薄的纱织品样品产生一个能在适当的文化情况之下形成细胞 monolayer 的细胞中止是更平常的。资讯科技是重要记得成功和主要细胞的重制度也耕种仰赖最初的薄纱织品的来源，而且主要叁数是: 种，年龄，性别，薄的纱织品类型和疾病状态。此外, 已经建立起源的种相配被需要的特性是重要的在那在 vitro 模型中想要。
胚胎的薄纱织品到在相等的成人薄纱织品中被发现的那些将会时常包含不同的细胞人口。当先驱者，祖先或干细胞可能生还而且不迟疑地增殖的时候，成人的薄纱织品包含在末端区别的可能是失去的细胞高比例在适当的情况。 不聚集薄的纱织品能用很多的细胞损害和释放表现极端怀敌意的环境有毒的酵素 , 像是蛋白。 萣生熟的分解选择是的紧要关头的步骤促进隔绝和重要细胞类型的生存。实际的不集合独自地正在损坏 (举例来说手拿着了 homogenisers, 研磨剂薄纱) 并且大体上只被用于一种温和的形式协助雇用化学药品和比较不有可能对细胞死亡引起的酵素其他的方法。二价的阳离子 ( 举例来说 Ca++,毫克++) 是重要的在细胞之间的附着中, 如此以温和的实际不集合被联合的 chelating 代理人 , 像是 EDTA, 可能是充份生产来自一些薄的纱织品的一个细胞中止。 然而，时常酵素的附加是必需的，而且 collagenase 及[或] 胰岛素最时常被用。 被用于这一个程序的酵素行动的模态是变数并且也可能有不同的生物学形式的特别蛋白 ( 举例来说 collagenases) 或来自不同的来源准备的活动广泛的变化。 特别的酵素可能为肺薄的纱织品举例来说作为特定的薄纱织品 elastase,对于连接着薄的纱织品的玻尿酸酵素。 较进一步的酵素可能是改善细胞中止 , 像是减少从被损坏的细胞被释放的 DNA 的黏质 deoxyribonuclease(DNase) 的质量所必要者。 特别的分解解决被选择的一次它也是重要将温度和期间的治疗最佳化给在一个单一细胞中止和高的生存能力