folin-Wu测血糖的原理

血液中的葡萄糖与碱性硫酸铜溶液共热,铜离子即被血液中的葡萄糖还原成氧化亚铜,后者又可使钼酸试剂还原成低价的钼蓝(蓝色).血糖的含量与产生的氧化亚铜成正比,氧化亚铜的量与形成的钼化合物的量成正比,可以用比色的方法进行测定.

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实验一 血糖的斐林法测定
一,实验目的
掌握Folin-Wu法测定血糖含量的原理和方法.
二,实验原理
1.血糖指的是血液中哪一种糖
葡萄糖是血液主要的糖类,因此测血糖含量就是测血液中葡萄糖的含量.
2.用什么方法测定
测定血液中葡萄糖的含量,即测复杂组分中一种物质的量,根据生化实验基本技术的原理,可采用分光光度法(比色法)进行测定.
3.葡萄糖可以用比色法直接测定吗
不行,可以用间接的方法.血液中的葡萄糖与碱性硫酸铜溶液共热,铜离子即被血液中的葡萄糖还原成氧化亚铜,后者又可使钼酸试剂还原成低价的钼蓝(蓝色).血糖的含量与产生的氧化亚铜成正比,氧化亚铜的量与形成的钼化合物的量成正比,可以用比色的方法进行测定.
三,材料,仪器与试剂
(一),材料:动物血液
(二),仪器(仪器的选择在实验开始前由学生在预习报告中提出方案后教师审定)
分光光度计,血糖管,奥氏吸管,水浴锅,表面皿
(三),药品(试剂的选择在实验开始前由学生在预习报告中提出方案后教师审定后并配制)
标准葡萄糖溶液,碱性硫酸铜溶液(A,B液),酸性钼酸盐溶液,10%钨酸钠溶液,0.33mol/L硫酸溶液
四,实验操作:
1.无蛋白血滤液的制备
用奥氏吸管吸取已加抗凝剂的全血1ml,缓缓放入20ml锥形瓶中,加水7ml,摇匀,血液变成红色透明时加10%钨酸钠1ml, 摇匀,再加 0.33mol /L 硫酸,随加随摇,加完放置5～15min,至沉淀由鲜红变为暗棕色,滤纸过滤.每毫升无蛋白血滤液相当于0.1ml全血.
2.血糖的测定
取具25ml刻度的血糖管3只,编号,用奥氏吸管吸取无蛋白血滤液2ml,放入第一只血糖管中,于第二只血糖管中加2ml标准葡萄糖溶液.第三只血