Folin酚法和凯氏定氮法相比较

来源:百度知道 编辑:UC知道 时间:2024/05/22 18:15:46
1.Folin—酚法和凯氏定氮法测定蛋白质含量相比较有什么优缺点?

2.测定蛋白质含量除Folin-酚试剂显色法以外,还可以用什么方法?

凯氏定氮法(Kjedahl法) 费时 8~10小时 用于标准蛋白质含量的准确测定;干扰少;费时太长

Folin-酚试剂法(Lowry法) 40~60分钟 操作要严格计时;颜色深浅随不同蛋白质变化

考马斯亮蓝法(Bradford法) 快速5~15分钟 干扰物质少;颜色稳定; 颜色深浅随不同蛋白质变化

还有什么紫外法,现在基本没人用了。

我现在也在做这方面得实验,希望可以给你一些建议。我以前用的是Bradford,简单方便。应该是用的人最多得一种方法,我也推荐你先用这种方法。

我现在用得是Folin-酚法,这种方法比较准确,但是需要买Folin-酚试剂,其他试剂可以自己配。每次要做BSA标准曲线。比较麻烦一点。

定氮法是要很精确才用得方法,我没用过。

  Folin-酚试剂法(Lowry法):以最早期的双缩脲法为基础,并有所改进。蛋白质与Cu2 反应,产生蓝色的反应物。但是与双缩脲法相比,Lowry 法敏感性更高。缺点是需要顺序加入几种不同的反应试剂;反应需要的时间较长;容易受到非蛋白物质的影响;含EDTA,Triton x-100,(NH4)2SO4等物质的蛋白不适合此种方法。
  凯氏定氮法的原理是检测食品总氮的含量,如果加入含氮(甘氨酸、尿素、三聚氰胺等)的化学品,这种方法是无法区别的。