关于RT-PCR的问题

来源:百度知道 编辑:UC知道 时间:2024/05/16 22:49:17
RT-PCR 第一步是一个反转录(reverse transcription),请问这一步之后所形成的cDNA是单链还是双链的呢?

我之前也用 通用引物扩增 鳜鱼的mt DNA。你可以用别人的样品扩增 试一试。你的问题首先不打明确,后来自己从新设计引物、作为前辈 我告诉你。如需帮助请留言,文献写的扩的出来,所谓通用引物的定义你好好看看就明白了、甚至没有。这个很正常。建议你重新设计特异性引物,看你扩增的效果是不是和别人一样 也是7-10个带如果和别人一样哈哈 你这是问对人了、说明通用引物对于你的样品(物种) 扩增多态性不好即3-4,我怎么弄就是出不来

做RT首先要知道第一步是提取细胞内的总RNA,
然后将RNA加入反转录酶进行PCR.
,反转录还是遵循碱基互补配对原则,
以mRNA为母链合成子链cDNA,所以只能是单链结构,
然后下一次循环时候则会以合成的cDNA为模版继续进行PCR剩余的过程

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