大豆活性肽的分离纯化方法

① 对大豆粉进行水、碱两步提取；
② 制作Folin-酚法测定蛋白浓度的标准曲线；
③ 测定两步提取液的蛋白浓度（Folin-酚法）；
④ 将提取的大豆蛋白制成丙酮干粉。
⑤ 用微量凯氏定氮法测定提取的大豆蛋白质含量：
样品→消化→蒸馏→滴定→计算
⑥ 双向纸层析测定大豆蛋白的氨基酸组成：
样品处理（水解）→点样→酸性层析液中展层→碱性层析液中展层→显色→ 定性鉴定。
关键步骤与注意事项
① 提取蛋白等电点沉淀时pH值的调节。
② Folin甲、乙试剂的使用条件和干扰因素；
③ 小心加样，切勿使样品沾污凯氏烧瓶口部、颈部。
④ 消化时，需斜放凯氏烧瓶（45o），火力先小后大，避免黑色消化物溅到瓶口、瓶颈壁上，以致影响测定结果。
⑤ 蒸馏时，切忌火力不稳，否则将发生倒吸现象。
⑥ 样品水解温度保持105度，使样品水解完全。
⑦ 层析液中的酸或碱的含量必须足够，而且在展层前必须用酸性层析液和氨水分别进行饱和，以防止层析滤纸上酸碱度不足的现象。

那就是过分子筛啊，过完可以跑以下2D，直接打质朴，或是过液相。当然也可以做下离子交换。