分离纯化米曲霉

实在不行只有从头开始了。从划线培养开始吧。
单菌落的挑取在10倍系列稀释的平板中进行，选取菌落数在30～300之间的平板，划线纯化方法如下：
对低于30个左右菌落的平板，每个菌落均挑取，划线纯化。
对50个左右菌落的平板，挑取1/2菌落划线纯化。
对100个左右菌落的平板，挑取特殊的菌落纯化。
反复划线纯化，至菌落形态和菌株形态分别完全一致，可认为是纯菌株。
优势菌的挑取在浸海2h～14d挂片系列稀释培养平板中进行，挑取1～2株优势菌落形态的菌株于2216E平板上划线纯化。
在纯化的菌株中加入适量甘油，保存于-80℃超低温冰箱中和-23℃冰箱中。
菌株鉴定
细菌鉴定按照《一般细菌常用鉴定方法》进行，将挑取纯化的菌株鉴定至属。鉴定试验包括形态观察、革兰氏染色、鞭毛染色、氧化酶反应、过氧化氢酶反应、运动性试验、葡萄糖氧化发酵试验、硫化氢试验、0/129试验、吲哚产生试验、色素产生试验及发光现象观察等项目，参照J.D.Oliver海洋细菌鉴定表，将附着细菌分类至属。

我觉得对于黄曲和酶曲来说没有分离开的培养基，还是用梯度稀释法来的快。
灭10个5ml蒸馏水的试管，取其中一个用枪头打入2ml的无菌水到试管，或者3ml到平板上，用接菌铲或灭菌后的涂布棒刮上面的孢子，枪吸取适量，到入无菌水试管中梯度稀释，找到相应的稀释浓度（多做几个），涂布平板，张出单菌落。
以上就是我做试验染菌以后做的工作，如果您怕做一次试验不成功，就用接种铲挖出来一块，放入无菌水中，制成菌旋液也是不错的。

采用硫酸铵沉降法分离纯化米曲霉M3所产中性蛋白酶,并对其酶学性质进行了研究.结果表明:用硫酸铵沉降法所得粗酶粉的酶活力高达159781.1u/g;该酶的最适反应温度为50℃,最适作用pH值为7.5;该酶在30～40℃时具有良好的热稳定性,在pH值6.5～7.5的条件下酶是稳定的;NH1+4,K1+对该蛋白酶有明显的激活作用,Fe3+则对其表现出强烈的抑制作用.