介绍几种检测基因表达水平的方法

来源:百度知道 编辑:UC知道 时间:2024/04/29 22:24:50
回答全面准确的追加20分

1 western bloting
a.将编码目标蛋白基因通过载体进行体外重组,然后导入宿主细胞表达
b.将目标蛋白注入兔子或其他动物体内获得一抗
c.将样品蛋白进行聚丙烯酰胺凝胶电泳、转移、吸附固定
d.用一抗与之杂交再用二抗检测其是否表达
2 fluorescent real-time PCR
a.提取样品总RNA,再通过超速离心获得mRNA
b.用逆转录酶获得cDNA
c.加入特异性探针
d.利用专门的仪器检测荧光强度即可
3半定量 PCR
a.提取样品总RNA,再通过超速离心获得mRNA
b.用逆转录酶获得cDNA
c.做半定量PCR
4cDNA microarray
5蛋白质 芯片
实质就是高通量的分子杂交,免疫酶连反应再运用计算机处理

检测胞内mRNA含量
检测蛋白表达情况