养大肠杆菌的具体步骤

复苏：
配制LB固体培养基，高压蒸汽灭菌，倒平板。
挑取菌种，在培养基上划线。
37℃培养24h至长出菌落。

摇菌
配制LB液体培养基。高压蒸汽灭菌。
无菌试管内加入3ml LB培养基，挑取单菌落加入培养基中，37℃，200rpm摇菌过夜。

扩大培养：
配制LB液体培养基。高压蒸汽灭菌。
三角瓶中加入50ml液体LB培养基，加入1ml菌液，37℃，200rpm摇菌至所需OD值。

注：培养基内需加入菌株所具有抗性的抗生素。

工具：超净工作台、酒精灯、接种针、试管、高压灭菌锅、培养皿等。
注意无菌操作。

1.配一瓶LB,然后灭菌
2.将保存的菌涂或者挑在固体培养基上,37度培养
3.将长出的菌挑单菌落到灭好的LB中,200转每分钟左右,37度振荡培养

(1)制作培养基(含碳源,氮源,生长因子,无基盐)
(2)给培养基消毒(很重要)
(3)接种
(4)培养