仅知道cDNA内的一段序列，两端的序列未知，如何用PCR的方法扩增全长的cDNA序列？

如果有条件，还是应该RACE，这是得到全长最正统的办法。知道几十bp应该够用了。

另外我奇怪的是，NCBI上没有你需要的蛋白的mRNA序列吗？猪是Sus scrofa，不妨再找找。既然小鼠和人里面都有，猪里面应该也有。你再去找找吧。如果能找到，设计引物就简单了。

还有一个办法，就是查查文献，有没有人以猪为对象做过这个gene，运气好的话能找到现成的primers的。

祝实验顺利。

用RACE和SMART进行其3’5’端的扩增

先找到已知序列的特异性引物，然后进行RACE扩增3’SMART扩增5’端

那你就用小鼠和人同源的那段来设计引物，但是要注意，PCR扩增的引物最后一个碱基必须匹配，否则无法扩增，所以实验要看运气了。因此你最好多设计几个3‘只相差一个碱基的引物，这样就可以确保最后一个碱基能匹配上

NCBI上先去找人的同源序列，前后的差异不会太大，然后查mRNA序列，然后在设计引物。